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dc.contributor.advisorStankova, Jana
dc.contributor.advisorRola-Pleszczynski, Marek
dc.contributor.authorYaddaden, Louizafr
dc.date.accessioned2015-07-22T14:20:52Z
dc.date.available2015-07-22T14:20:52Z
dc.date.created2015fr
dc.date.issued2015-07-22
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11143/7515
dc.description.abstractLes cystéinyl-leucotriènes (cysLTs) sont des médiateurs lipidiques pro-inflammatoires impliqués dans l'asthme, liant trois récepteurs couplés aux protéines G: CysLT[indice inférieur 1], CysLT[indice inférieur 2] et GPR99. Des polymorphismes de deux de ces récepteurs, CysLT[indice inférieur 1]-G300S et CysLT[indice inférieur 2]-M201V, ont été fortement associés à l’atopie, une prédisposition aux allergies, alors que le polymorphisme CysLT[indice inférieur 1]-I206S n’y est pas significativement associé. Il a été montré précédemment que le variant CysLT[indice inférieur 2]-M201V avait une signalisation diminuée. L'objectif du projet était d'étudier la signalisation cellulaire des variants CysLT[indice inférieur 1]-G300S et CysLT[indice inférieur 1]-I206S, ainsi que l’interaction du variant CysLT[indice inférieur 1]-G300S avec le récepteur CysLT[indice inférieur 2]-M201V. La lignée cellulaire HEK-293 a été transfectée avec les ADNs plasmidiques codant pour des récepteurs de type sauvage et mutants. L’expression de surface des récepteurs a été vérifiée par cytométrie en flux. La production d’inositol phosphates (IPs) et la transactivation des promoteurs de l’IL-8 et de l’IL-13 ont été mesurées par essai IP-1 et essai luciférase, respectivement, en réponse au LTD[indice inférieur 4] et LTC[indice inférieur 4]. Ensuite, la phosphorylation de principaux effecteurs de signalisation (Erk1/2, p65, p38 et c-Jun) suite à l’activation des récepteurs par le LTD[indice inférieur 4], a été évaluée par immunobuvardage Western. Enfin, l’interaction entre les récepteurs a été étudiée par des expériences de BRET (Bioluminescence Resonance Energy Transfer) et BiFC (Bimolecular Fluorescent Complementation), en plus d’expériences de type fonctionnel en co-expression. L’expression de surface des récepteurs mutants et de type sauvage est équivalente. Le variant CysLT[indice inférieur 1]-G300S induit une plus forte production d’IPs et une plus grande transactivation des promoteurs de l’IL-8 et de l'IL-13 que le récepteur de type sauvage. De plus, la phosphorylation de Erk1/2 est également augmentée par l’activation de ce variant. Par contre, le récepteur CysLT[indice inférieur 1]-I206S ne montre pas de différence significative dans sa transduction de signal. La co-expression des récepteurs CysLT[indice inférieur 1]-G300S et CysLT[indice inférieur 2]-M201V n’affecte pas leur expression de surface, mais résulte en une faible transactivation du promoteur de l’IL-8 et une production réduite d’IPs en réponse au LTD[indice inférieur 4]. Enfin, les récepteurs ont la capacité d’interagir et de dimériser entre eux. En conclusion, ces résultats suggèrent que le variant CysLT[indice inférieur 1]-G300S induit une plus forte réponse que le récepteur de type sauvage. Cependant, bien qu’il puisse dimériser et interagir avec le variant CysLT[indice inférieur 2]-M201V, ce dernier domine la réponse combinée lorsqu’il est co-exprimé avec le variant CysLT[indice inférieur 1]-G300S.fr
dc.language.isofrefr
dc.language.isoengfr
dc.publisherUniversité de Sherbrookefr
dc.rights© Louiza Yaddadenfr
dc.rightsAttribution - Pas d’Utilisation Commerciale - Pas de Modification 2.5 Canada*
dc.rightsAttribution - Pas d’Utilisation Commerciale - Pas de Modification 2.5 Canada*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/ca/*
dc.subjectCystéinyl-leucotriènefr
dc.subjectVariantfr
dc.subjectAtopiefr
dc.subjectCysLT[indice inférieur 1]fr
dc.subjectSignalisationfr
dc.subjectCysLT[indice inférieur 2]fr
dc.subjectInteractionfr
dc.titleCaractérisation de variants du récepteur des cystéinyl leucotriènes de type 1, CysLT[indice inférieur 1]-G300S et CysLT[indice inférieur 1]-I206Sfr
dc.typeMémoirefr
tme.degree.disciplineImmunologiefr
tme.degree.grantorFaculté de médecine et des sciences de la santéfr
tme.degree.levelMaîtrisefr
tme.degree.nameM. Sc.fr


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