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Mise au point d'un essai kinase in vitro pour la MAPKKK[indice supérieur DLK] et identification de ses activateurs

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MQ74350.pdf (3.327Mb)
Publication date
2001
Author(s)
Daviau, Alex
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Abstract
Les "mitogen-activated protein kinases" (MAPKs) forment une famille de protéines exerçant un rôle crucial dans la régulation de nombreux processus physiologiques, tels la prolifération, la différentiation, l'apoptose et la survie cellulaire, en permettant la transmission de signaux extracellulaires jusqu'au noyau. Cette cascade de transduction se compose de trois principales voies et chacune de ces voies est constituée d'un module de trois protéines kinases différentes, que l'on désigne les MAPKKKs, MAPKKs et MAPKs selon leur position dans le module. Notre laboratoire s'intéresse particulièrement à un des membres de la famille des MAPKKKs soit la MAPKKK [indice supérieur DLK]. Cette dernière, qui est située en amont de la cascade, est une sérine/thréonine kinase appartenant à la famille des"mixed-lineage kinases" (MLKs). Bien que les MLKs soient des activateurs d'un sous-groupe de MAPKs [indice supérieur JNK] dont la fonction est généralement associée à l'arrêt de la croissance cellulaire et/ou l'apoptose, il n'existe encore aucune donnée expérimentale démontrant l'implication directe de ces protéines dans l'un ou l'autre de ces processus biologiques. Afin de caractériser ces mécanismes d'action, nous avons tenté d'identifier les activateurs susceptibles de stimuler l'activité kinase de la MAPKKK [indice supérieur DLK]. Pour ce faire, nous avons établi un système in vitro qui reconstitue entièrement la cascade de la voie des MAPKs[indice supérieur JNK]. Ce système a permis de mesurer directement les modulations de l'activité enzymatique endogène et transfectée de la MAPKKK[indice supérieur DLK] suite à certaines stimulations. Grâce à l'efficacité de ce système, ces travaux ont permis de démontrer pour la première fois une activitation de la forme endogène et transfectée de la MAPKKK [indice supérieur DLK], en réponse à des stimuli extracellulaires pro-apoptotiques.
URI
http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/4502
Collection
  • Sciences – Mémoires [1602]

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