Caractérisation de l'expression des isoformes de la cyclooxygénase et des récepteurs aux prostaglandines chez les ostéoclastes humains matures en culture

Abstract

Les prostaglandines sont d'importants médiateurs dans le métabolisme osseux. Elles ont des effets directs et indirects sur les cellules osseuses et ces effets peuvent différer d'une espèce à l'autre. Nous avons utilisé un modèle ex vivo pour démontrer la présence des cyclooxygénases et des récepteurs aux prostaglandines chez les ostéoclastes matures humains.Les ostéoclastes ont été extraits à partir de foetus humains entre 14 et 20 semaines de gestation. Ces cellules étaient multinucléées, TRAP positives, sensibles à la calcitonine et étaient capables de résorber l'os. Nous avons montré, en utilisant des sondes oligonucléotidiques marquées à la digoxigénine en hybridation in situ, la présence de l'ARNm de la cyclooxygénase-1 et 2 (COX-1 et COX-2) ainsi que les ARNm des récepteurs EP[indice inférieur 3] et EP[indice inférieur 4]. La présence des COXs et des récepteurs a été confirmée par immunohistochimie. La COX-1 se retrouvait exprimée au cytoplasme tandis que la COX-2 se trouvait à la périphérie des noyaux. À l'aide d'une sonde fluorescente (H[indice inférieur 2]DCFDA) et d'anti-inflammatoires, une activité cyclooxygénase élevée a été démontrée chez les ostéoclastes matures foetaux. La localisation du récepteur EP[indice inférieur 3] était majoritairement membranaire tandis que le récepteur EP[indice inférieur 4] était nucléaire.Les études fonctionnelles ont permis d'observer que le récepteur EP[indice inférieur 3] était responsable de la diminution des lamellipodes, suggérant une implication de ce récepteur dans la régulation de la motilité des ostéoclastes. L'activation du récepteur EP[indice inférieur 4] avait pour effet de diminuer la formation de l'anneau d'actine, suggérant donc que le récepteur EP[indice inférieur 4] était impliqué dans la régulation de la résorption osseuse.