Caractérisation pharmacologique du récepteur B [indice] 1 humain des kinines et de ses antagonistes

Abstract

Les kinines exercent des effets relaxants ou contractiles, sur les vaisseaux de plusieurs espèces animales, via l'activation des récepteurs de type B[indice inférieur 2] ou B[indice inférieur 1]. Ces récepteurs ont été étudiés chez la veine ombilicale humaine (VOH) et l'aorte de lapin (AL) ; deux tissus vasculaires sur lesquels les récepteurs B[indice inférieur 2] et B[indice inférieur 1] véhiculent la vasoconstriction. Nous avons caractérisisé ces récepteurs à l'aide d'agonistes et antagonistes ; la dégradation de ces derniers composés par des enzymes protéolytiques, a également été étudiée. Les résultats obtenus in vitro, à l'aide de la technique conventionnelle des bains à tissus isolés, ont montré que le récepteur B[indice inférieur 1] de la VOH peut être induit de novo et qu'il manifeste une sensibilité supérieure (50-100 fois) aux composés homologues (agoniste et antagoniste) possédant un groupement lysyl en N-terminal ; la LysBK et la BK, deux agonistes naturels des récepteurs B[indice inférieur 2] des kinines étant inactifs (pD[indice inférieur 2]<6.0) sur le récepteur B[indice inférieur 1] humain de la VOH. Les antagonistes B[indice inférieur 1] de première génération (e.g. Lys[Leu[indice supérieur 8]]desArg[indice supérieur 9]BK (pA[indice inférieur 2] 7.99) et [Leu[indice supérieur 8]]desArg[indice supérieur 9]BK (pA[indice inférieur 2] 6.37)) inhibent les réponses venoconstrictrices des agonistes B[indice inférieur 1]. Une étude de corrélation (utilisant 22 composés ; agonistes et antagonistes) entre les données obtenues à l'aide de l'AL et celles de la VOH, a montré la ressemblance pharmacologique de ces sites fonctionnels. Une étude de structure-activité, comprenant des modifications (acétylation, méthylation de résidus aminoacyls) et/ou substitutions chimiques (e.g. acide aminé non naturel de nature hydrophobe, de configuration stéréochimique D) apportées aux positions 0 (Lys), 5 (Phe), 7 (Pro) et 8 (Phe) de la séquence en acides aminés de la Lys[Leu[indice supérieur 8]]desArg[indice supérieur 9]BK, a été effectuée. Ceci dans le but de promouvoir une résistance multienzymatique (notamment contre l'enzyme de conversion de l'angiotensine (ECA) et l'aminopeptidase M (AmM)) et d'augmenter l'affinité pour le récepteur B[indice inférieur 1] humain des kinines. Certains prototypes conçus montrent de fortes puissances antagonistes in vitro tout en étant dépourvus d'activités agonistes résiduelles. En exemple, l'un de ces prototypes soit l'AcLys[([indice supérieur alpha]Me)Phe[indice supérieur 5],D[bêta]Nal[indice supérieur 7],Ile [indice supérieur 8]]desArg[indice supérieur 9]BK (R 892) s'est révélé résistant in vitro à la dégradation par l'ECA et l'AmM tout en possédant de fortes affinités (pA[indice inférieur 2][presque égal à]8.7) pour les récepteurs B[indice inférieur 1] de la VOH et de l'AL. In vivo, ce même composé antagonise fortement (DI[indice inférieur 50] 2.8 nmol/kg i.v.) la réponse hypotensive de la desArg[indice supérieur 9]BK exogène chez le lapin anesthésié et prétraité au LPS. Cette étude est la première démonstration de la présence possible du récepteur B[indice inférieur 1] au niveau du système cardiovasculaire chez l'homme. À l'instar du récepteur B[indice inférieur 1] de lapin, ce récepteur montre une haute affinité pour les peptides agonistes et antagonistes contenant un groupement NH[indice inférieur 2]-lysyl. Étant facilement disponible, nous espérons que la VOH pourra servir aux analyses de criblage de nouvels agents actifs chez l'homme. De plus, les nouveaux antagonistes stables développés, à l'occasion des travaux rapportés ici, pourront être utiles (perspective thérapeutique?) pour élucider les rôles potentiels joués par les récepteurs B[indice inférieur 1] des kinines chez l'homme en physiologie et physiopathologie.