Implication des facteurs de transcription C/EBP[lettre grecque alpha] ,C/EBPβ et C/EBP[lettre grecque delta] dans le contrôle de la prolifération et de la réponse inflammmatoire des cellules épithéliales intestinales de rat

Abstract

Les isoformes C/EBPs sont exprimées et modulées dans les cellules épithéliales intestinales. Le rôle précis de ces facteurs de transcription est toutefois inconnu dans le contexte intestinal. Dans ce travail, l'étude des fonctions des isoformes C/EBPs au niveau du contrôle de la prolifération et de la réponse inflammatoire des cellules épithéliales intestinales a été effectuée chez le rat de même que dans la lignée cellulaire IEC-6. Dans un premier temps, nous avons observé une corrélation dans la localisation de l'expression des protéines C/EBP[alpha] et p21/WAF1/CIP1 le long de l'axe crypte-villosité. Le traitement des cellules IEC-6 par l'agent antimitotique TGF[bêta] induit les niveaux de protéine de C/EBP[alpha] et les niveaux d'ARNm et de protéine de p21/WAF1/CIP1. La surexpression de la protéine C/EBP[alpha] inhibe la prolifération des cellules IEC-6. Finalement, C/EBP[alpha] transactive le promoteur de p21/WAF1/CIP1. Afin de déterminer si les membres de la famille C/EBP sont impliqués dans la régulation de la réponse inflammatoire des cellules épithéliales intestinales, l'étude de l'effet des glucocorticoïdes sur l'expression du gène [alpha]1-glycoprotéine acide et des isoformes C/EBPs a d'abord été effectuée. L'injection de glucocorticoïdes chez le rat résulte en une induction variable des niveaux d'ARNm de l'[alpha]1-glycoprotéine acide le long de l'axe proximal-distal de l'intestin. Cette induction est limitée aux cellules épithéliales tel que révélé par hybridation in situ. Les glucocorticoïdes stimulent la capacité de liaison de C/EBP[bêta] et [delta] aux sites C/EBP-spécifiques du promoteur du gène [alpha]1-glycoprotéine acide dans les cellules IEC-6. L'addition du TGF[bêta] diminue l'effet d'induction des glucocorticoïdes sur l'expression de l'[alpha]1-glycoprotéine acide. Cette réponse est associée à une diminution des niveaux de protéine ainsi que de l'activité de liaison des isoformes C/EBP[bêta] et [delta] à l'ADN. La mutation des sites C/EBP-spécifiques du promoteur du gène [alpha]1-glycoprotéine acide diminue la réponse aux glucocorticoïdes et au TGF[bêta] dans les cellules IEC-6. De plus, l'addition du TNF[alpha] aux cellules IEC-6 stimule l'expression des facteurs C/EBP[bêta] et [delta] et mène à une induction de l'expression d'un autre gène de la réponse inflammatoire aigue [i.e. aiguë], soit l'haptoglobine. Cet effet est aussi diminué par l'addition du TGF[bêta] aux cellules en présence de TNF[alpha]. Enfin, le traitement des rats aux lipopolysacharides ou au dextran sulfate de sodium résulte en une induction transitoire de l'expression différentielle des gènes APP le long de l'axe proximal-distal de l'intestin. Ces observations suggèrent que la protéine C/EBP[alpha] est impliquée dans le contrôle de la prolifération et que les isoformes C/EBP[bêta] et [delta] sont impliquées dans la régulation de gènes de la réponse inflammatoire dans les cellules épithéliales intestinales.