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Étude de l'expression des gènes C/EBP [alpha], [bêta] et [delta] dans les cellules IEC-6 normales et cellules transformées par Ha-ras

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Zannoni_Sonia_PhD_1997.pdf (12.28Mb)
Publication date
1997
Author(s)
Zannoni, Sonia
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Abstract
Les mécanismes moléculaires qui régulent l'expression de gènes exprimés dans l'intestin sont encore à ce jour très peu connus. Cependant, plusieurs études ont montré une expression des facteurs de transcription C/EBPs dans l'intestin. De plus, les C/EBPs sont régulés par les glucocorticoïdes au niveau des cellules épithéliales intestinales. Le premier objectif de ce travail était d'approfondir les mécanismes de régulation des facteurs de transcription C/EBPs, et le deuxième, de déterminer l'effet de la transformation par Ha-ras et des glucocorticoïdes sur l'expression des facteurs de transcription C/EBPs, Jun et Fos dans les cellules épithéliales intestinales. Afin de répondre à ces objectifs, la lignée cellulaire IEC-6 a été utilisée. Cette ligne épithéliale intestinale non transformée constitue un modèle d'étude bien caractérisé et très utilisé. La régulation des isoformes C/EBPs a été étudiée par les méthodes de Northern blot, de transfert de type Western et des gels de rétention, suite à des traitements avec des inhibiteurs de protéines kinases (staurosporine) et protéines phosphatases (acide okadaïque et vanadate). Également, la transformation des cellules IEC-6 avec Ha-ras a été faite par la méthode de transfection : l'électroporation.Les résultats obtenus tendent à démontrer une régulation différentielle des isoformes C/EBP α, β, et δ suite aux traitements avec des activateurs ou des inhibiteurs de phosphorylation. De plus, une prolifération cellulaire accélérée dans les cellules transformées par rapport aux cellules non transformées a été observée. Également, la présence d'ARNm supplémentaires et spécifiques à la transformation par Ha-ras pour l'isoforme C/EBP α a été constatée.Les glucocorticoïdes inhibent la prolifération des cellules IEC-6 sans affecter celle des cellules transformées. Et une résistance à l'effet de la dexaméthasone entraînant un blocage de la transcription de c-fos dans les cellules transformées a été observée, ce qui suggère une séquestration des facteurs de transcription importants dans la régulation de la transcription de c-fos.Les résultats présentés suggèrent des mécanismes de régulation différentielle des facteurs de transcription C/EBPs et que les membres de la famille Jun et Fos sont des cibles des glucocorticoïdes dans les cellules épithéliales intestinales.
URI
http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/4098
Collection
  • Médecine et sciences de la santé – Thèses [743]

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