Désensibilisation du récepteur AT[indice inférieur 1] de l'angiotensine II chez les cellules de la zone glomérulée du cortex surrénalien de boeuf

Abstract

L'angiotensine II (Ang II) est une importante régulatrice de la synthèse d'aldostérone par les cellules glomérulées du cortex surrénalien. Sur ces cellules, l'Ang II interagit avec le récepteur AT[indice inférieur 1] qui est couplé à une protéine Gq qui contrôle l'activité de la phospholipase C. Les mécanismes qui régulent et désensibilisent le récepteur AT [indice inférieur 1] sont encore mal définis. Dans ce travail, nous voulons caractériser ces mécanismes chez les cellules glomérulées lors de prétraitements avec des faibles (10 nM) et des fortes (1 [micro]M) concentrations d'Ang II pour différentes périodes de temps. Les résultats ont démontré que lorsqu'on stimule avec 10 nM Ang II pour 30 min, le récepteur AT[indice inférieur 1] est internalisé dans la cellule. Suite à ces expériences, nous avons démontré qu'il y a un mécanisme de recyclage du récepteur à la surface de la cellule. Ce mécanisme rétablit le niveau de récepteurs AT[indice inférieur 1] sur la membrane plasmique. Ce phénomène, dépendant de la température, est inhibé à 4[degrés celsius] et bloqué par un inhibiteur connu du recyclage des récepteurs, la monensine. Le récepteur recyclé est de faible affinité suggérant qu'il est découplé de sa protéine G. Par contre, lorsqu'on stimule les cellules avec des concentrations plus élevées (1 [micro]M) d'Ang II, le récepteur AT[indice inférieur 1] semble prendre une voie de régulation négative. Dans cette voie, le nombre de récepteurs à la surface de la cellule et le niveau d'ARNm du récepteur AT[indice inférieur 1] diminuent. Nous avons regardé la fonctionnalité du récepteur AT[indice inférieur 1] dans ces conditions en mesurant la production d'InsP[indice inférieur]3, la potentiation de la production d'AMP cyclique induite par l'ACTH et la sécrétion d'aldostérone. On observe que la production d'InsP[indice inférieur 3] est désensibilisée uniquement lors de fortes stimulations (0.1-1 [micro]M) pendant de longues périodes de temps (de 12 à 24 h). La production d'aldostérone et l'effet potentiateur sur la production d'AMP cyclique sont aussi inhibés de manière significative suite à un prétraitement pendant 24 h avec de fortes concentrations d'Ang II. La désensibilisation semble être homologue, car un prétraitement pendant 24 h avec 1 [micro]M Ang II n'affecte pas la réponse cellulaire de la bradykinine, du fluorure de sodium et de l'ACTH. Ces résultats suggèrent que le récepteur AT[indice inférieur 1] peut activer plusieurs voies de régulation lors d'une stimulation avec l'Ang II. Par contre, seule une stimulation extrême du système (1 [micro]M pour 12 à 24 h) peut induire une désensibilisation fonctionnelle des réponses cellulaires. Il est probable que seul le récepteur AT[indice inférieur 1] est désensibilisé, car d'autres stimuli peuvent encore activer leurs mécanismes de transduction. Les récepteurs AT[indice inférieur 1] des cellules glomérulées constituent un modèle très résistant à la désensibilisation par l'Ang II. Ces études nous aideront à mieux comprendre le fonctionnement du récepteur AT[indice inférieur 1]. Ces résultats constituent aussi un apport original aux études de désensibilisation et peuvent servir d'exemple dans le cas d'autres hormones qui utilisent un mécanisme d'action semblable à celui de l'Ang II.