Visualisation de la liaison du complexe hétérodimérique des b-HLH-LZS de c-Myc et de Max aux séquences E-box du promoteur HTERT

Abstract

Les protéines Myc et Max appartiennent à la famille de facteurs de transcription de type b-HLH-LZ. L'hétérodimérisation entre Myc et Max, ou l'homodimérisation de Max permet à ces protéines de lier des séquences spécifiques au niveau de l'ADN (E-box,"CACGTG"). Des résultats récents suggèrent que l'hétérodimère c-Myc/Max pourrait interagir de manière tête-à-queue, composant ainsi un dimère de dimères, et former une boucle dans les promoteurs contenant plus d'une séquence E-box. Afin d'améliorer les connaissances actuelles du mécanisme transcriptionnel de l'hétérodimère c-Myc/Max, les complexes formés entre ce dernier et un fragment du promoteur hTERT (comprenant 2 E-box) ont été visualisés par AFM. Bien que la spécificité de la liaison de l'hétérodimère ait été observée au niveau de chaque site, aucune boucle ne fut détectée. Ce résultat a aussi été confirmé par des essais sur gel dans lesquels l'hétérodimère c-Myc/Max est capable de retarder une sonde E-box avec la masse moléculaire apparente d'un dimère. Un contrôle positif, effectuer avec un tétramère artificiel et obligatoire, a permis d'observer par AFM des boucles et croisements spécifiques parmi les brins d'ADN.Les résultats obtenus indiquent que si le dimère de dimères c-Myc/Max existe en solution, les interactions impliquées dans son oligomérisation sont probablement trop faibles pour permettre la formation de structures complexes dans un promoteur.