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Implication du facteur de transcription SOX9 dans la régulation du gène de la furine lors de la différenciation de la lignée chondrocytaire ATDC5

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MR31399.pdf (4.550Mb)
Publication date
2006
Author(s)
Guimont, Philippe
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Abstract
La convertase à proprotéine furine est exprimée de façon ubiquiste chez les vertébrés. Elle est impliquée dans la maturation d'un éventail très large de substrats dont certains jouent un rôle de premier plan dans le processus de chondrogenèse. Dans le but de déterminer l'implication de la furine dans ce processus, nous avons utilisé la lignée cellulaire préchondrocytaire ATDC5. Il s'agit d'un modèle établi de différenciation chondrocytaire in vitro. Des essais de différenciation de la lignée cellulaire ATDC5 ont permis d'observer une augmentation dans les niveaux d'expression d'ARNm de la furine parallèlement aux niveaux d'ARNm du collagène de type H et de Sox9. Ce dernier est un facteur de transcription essentiel pour la formation de cartilage et qui porte un motif de liaison à l'ADN de type HMG. Les essais de transfections transitoires effectués avec un plasmide contenant la région codante de la protéine Sox9 ont démontré que cette dernière avait la capacité d'augmenter les niveaux d'ARNm de la furine via son promoteur P1A. Notre étude de délétion en 5' de ce promoteur nous a permis de déterminer que la région -2096/-1563 était nécessaire à la réponse à Sox9. Par gel de rétention, il a été possible de démontrer que l'action directe de Sox9 sur le promoteur P1A était limitée à deux sites de reconnaissance Sox soit 5' CATTGTT 3' et 5' CAGTTTC 3' nommé respectivement site A et B. L'action de Sox9 sur le gène de la furine est inhibée par L-Sox5 et Sox6, deux facteurs de transcription homologues impliqués dans la différenciation des chondrocytes. L'effet inhibiteur de Sox6 est levé lorsqu'une version mutée, exempte du domaine de liaison à l'ADN de type HMG fonctionnel, est utilisée. Ceci suggère que l'effet répressif de Sox6 est médié par sa liaison au site de reconnaissance sur l'ADN. Ensemble, ces résultats nous indiquent que Sox9 régule l'expression de la furine lors de la chondrogenèse. De plus, ils suggèrent que Sox6, via sa boîte HMG, joue un rôle de régulateur négatif dans ce phénomène.
URI
http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3878
Collection
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires [1598]

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