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Le récepteur constitutivement actif N111G-AT[indice inférieur 1] modifie la morphologie et l'organisation du cytosquelette des cellules HEK-293

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Turgeon_Eric_MSc_2005.pdf (4.905Mb)
Date de publication
2005
Auteur(s)
Turgeon, Éric
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Résumé
Le récepteur AT1 est responsable de la plupart des effets physiologiques de l'angiotensine II. L'expression du récepteur constitutivement actif N111G-AT1 cause une augmentation de la production basale d'inositol phosphates dans les cellules HEK-293. Dans le but d'étudier les mécanismes adaptatifs sous-jacents à l'expression du récepteur constitutivement actif N111G-AT1 , nous avons évalué la morphologie et l'organisation du cytosquelette d'actine des cellules exprimant ce récepteur. Nous avons observé une réorganisation majeure dans le cytosquelette de ces cellules, caractérisée en microscopie à contraste de phase, par des contacts intercellulaires très étroits et par l'absence de prolongements membranaires. En microscopie confocale, les cellules présentent de nombreuses fibres de stress à leur côté basolatéral et une structure organisée en nid d'abeille à leur côté apical. Cette organisation du cytosquelette d'actine suggère des contacts étroits entre les cellules. En stimulant des cellules exprimant le récepteur AT1 de type sauvage avec de l'Ang II, nous avons aussi observé le même type de réarrangement du cytosquelette et l'adoption d'une morphologie semblable à celle adoptée par les cellules exprimant le récepteur N111G-AT1. L'agoniste inverse EXP3174 a empêché l'adoption du phénotype particulier des cellules exprimant le récepteur N111G-AT1. Un inhibiteur sélectif de la protéine kinase C (Ro-31-8425) et le chélateur de Ca 2+ interne (BAPTA-AM) n'ont pas empêché l'adoption du phénotype particulier des cellules exprimant le récepteur N111G-AT1. Par contre un inhibiteur de Rho-kinase (Y-27632) a empêché l'adoption du phénotype particulier. Ces résultats soulignent l'impact profond que peut avoir un récepteur mutant constitutivement actif sur le phénotype cellulaire et ils suggèrent que dans le cas du récepteur N111G-AT1, Rho-kinase joue un rôle important dans les changements morphologiques observés chez les cellules HEK-293.
URI
http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3790
Collection
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires [1689]

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