Modulation de l'épissage alternatif de Bcl-x par les protéines hnRNP F et H in vitro

Abstract

L'épissage alternatif est un mécanisme permettant d'augmenter la diversité protéique dans une cellule. Dans certains cas, les isoformes ainsi créés peuvent avoir des activités complètement différentes. Une telle situation implique le gène apoptotique Bcl-x qui produit des isoformes ayant des activités antagonistes dans l'apoptose. Ces isoformes sont formés par l'utilisation de sites d'épissage 5' alternatifs. L'isoforme Bcl-xL possède une activité anti-apoptotique alors que Bcl-xS possède une activité pro-apoptotique. Mes recherches ont permis de trouver deux régions exoniques responsables de la régulation de l'épissage alternatif de ce gène. Une première région B2, située en aval du site d'épissage de Bcl-xS , active la formation de l'isoforme Bcl-xS alors qu'une deuxième région B3, située en amont du site d'épissage de Bcl-xL, active la formation de l'isoforme Bcl-xL. Plus précisément, une sous-région B2G est principalement responsable de l'activité de la région B2 et possède une séquence constituée de trois séries de G pouvant recruter les protéines hnRNP F et hnRNP H. De plus, les deux dernières séries de G sont importantes pour l'activité de l'élément B2G ainsi que pour la liaison des protéines à cette séquence. Nous avons aussi montré que l'ajout de hnRNP F ou H dans une réaction d'épissage in vitro permet de moduler l'épissage de Bcl-x en favorisant la formation de l'isoforme Bcl-xS. Cette modulation n'est cependant pas obtenue lorsque que l'élément B2G est muté. Mon étude montre aussi que, in vitro, l'ajout des protéines hnRNP Al et SRp30c stimule la production de l'isoforme Bcl-xL. Cet effet se ferait via un autre élément que B2G puisque ni hnRNP A1, ni SRp30c ne lient cette séquence.