Dimérisation du récepteur humain de la prostacycline (hIP)

Abstract

À l'aide de coimmunoprécipitations (COIPP) et de buvardages Western (WB), et en utilisant des récepteurs dotés d'épitope de nature différente (HA ou Flag), nous avons établi que le récepteur hIP pouvait former des dimères et des oligomères. Nous avons par la suite tenté, par la conception de divers mutants de délétion et ponctuels, de déterminer la nature et la localisation des domaines impliqués dans la dimérisation/oligomérisation du récepteur hIP, sans toutefois y parvenir avec la précision espérée. Nous pouvons néanmoins suggérer l'existence de deux liens disulfure extracellulaires--un étant généré entre les Cys[indice supérieur 5] et Cys[indice supérieur 165], et l'autre entre les Cys[indice supérieur 92] et Cys[indice supérieur 170]. Ces liens joueraient un rôle majeur dans la dimérisation/oligomérisation du récepteur hIP en plus du maintien conformationnel protéique caractéristique des GPCRs. De plus, nous avons constaté par ELISA que plusieurs mutants hIP capables de dimérisation/oligomérisation n'étaient pas exprimés à la surface cellulaire, ce qui indiquerait la formation des dimères/oligomères hIP dans les compartiments intracellulaires. Nous avons finalement observé par WB que la dimérisation/oligomérisation du récepteur hIP n'était pas affectée en présence de l'agoniste cPGI[indice inférieur 2] (carbaprostacycline)".--Résumé abrégé par UMI.