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Implication de l'endocytose du BLT1 et de l'activation de la kinase Yes dans la dégranulation du neutrophile induite par le leucotriène B[indice inférieur 4]

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MR00257.pdf (8.349Mb)
Publication date
2004
Author(s)
Gaudreault, Eric
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Abstract
Une des activités biologiques importantes du neutrophile humain est la dégranulation qui peut être induite par le leucotriène B4 (LTB4). Nous avons étudié les voies de signalisation intracellulaires menant à la dégranulation du neutrophile impliquant le récepteur de haute affinité du LTB4, le BLT1. Des neutrophiles humains de même que la lignée cellulaire humaine pro-myéloïde PLB-985 transfectée de façon stable avec l'ADNc du BLT1 et différenciée en type neutrophile ont été utilisés lors de cette étude. Le relâchement de l'enzyme [béta]-hexosaminidase induit par le LTB4 était inhibé de 50-80% lorsque les cellules étaient prétraitées avec les inhibiteurs pharmacologiques d'endocytose, soit le sucrose, la concanavaline A et le NH4C1. De plus, une transfection transitoire d'une forme mutante de type dominant négatif de la dynamine (K44A) a mené à approximativement 70% d'inhibition de la dégranulation induite par le ligand. Un prétraitement de neutrophiles ou de cellules PLB-985 exprimant le BLT1 avec l'inhibiteur de la famille des Src kinases, PP1, diminuait de 30-60% la dégranulation impliquant le BLT1. Yes kinase, mais pas c-Src ou Fgr, présente une activité kinase augmentée après une stimulation avec le LTB4. De plus, la transfection transitoire de la dynamine de type dominant négatif inhibait cette activation, suggérant que l'endocytose du BLT1 est nécessaire à l'activation de Yes. La dégranulation induite par le LTB4 semble de plus être partiellement sensible à l'inhibition de la phosphatidyl inositol 3' (PI-3) kinase. D'un autre côté, la dégranulation n'était pas affectée par l'inhibition des MAP kinases MEKK ou p38, les Janus kinases ou les récepteurs tyrosines kinases epidermal growth factor receptor (EGFR) et platelet-derived growth factor receptor (PDGFR). En résumé, nos résultats démontrent un rôle essentiel de l'endocytose du BLT1 et de l'activation de Yes kinase dans la dégranulation du neutrophile induite par le LTB4.
URI
http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3370
Collection
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires [1598]

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