Identification des résidus contribuant à l'interaction hnRNP A1- hnRNP A1

Abstract

HnRNP A1 est une protéine impliquée dans la sélection des sites 5 ' d'épissage in vitro et in vivo . Il est connu que son domaine riche en glycines est important pour médier son activité dans l'épissage alternatif. Le modèle"looping-out" a été proposé comme mécanisme d'action de A1; lorsque A1 lie des sites de haute affinité localisés dans la région intronique de part et d'autre d'un exon alternatif, l'exclusion de celui-ci est favorisé par une interaction A1-A1 impliquant le domaine riche en glycines. Les régions et les acides aminés impliqués dans l'interaction A1-A1 restent méconnus. Une mutagénèse aléatoire de l'ADNc de A1, suivie d'une approche génétique chez la bactérie basée sur la répression traductionnelle, nous a permis d'aborder l'importance du domaine riche en glycines et du domaine RRM2 dans la liaison coopérative de la protéine hnRNP A1 à PARN. La majorité des mutants identifiés montrent un défaut au niveau de l'interaction A1-A1 lorsque quantifiés dans un essai double-hybride chez la levure."--Résumé abrégé par UMI.