Caractérisation des activités catalytiques du récepteur histidine kinase phoQ de Salmonella enterica serovar Typhimurium et des mutants de la position 179

Abstract

L'activité histidine kinase du récepteur PhoQ de Salmonella enterica serovar Typhimurium est régulée par la concentration extracellulaire de Mg[indice supérieur 2+]. Il semble que le Mg[indice supérieur 2+] soit le ligand physiologique de PhoQ. Dans cette étude, nous avons caractérisé in vitro et in vivo la régulation des activités catalytiques de PhoQ par le Mg[indice supérieur 2+]. Nous avons également voulu identifier les résidus du domaine périplasmique de PhoQ impliqués dans la liaison du Mg[indice supérieur 2+]. Des études in vitro ont montré que l'autophosphorylation de PhoQ nécessite la présence d'ATP et d'ions divalents tels que le Mg[indice supérieur 2+], le Mn[indice supérieur 2+], le Ca[indice supérieur 2+] et le Ba[indice supérieur 2+]. Cependant, à des concentrations supérieures à 0,1mM de MgCl [indice inférieur 2] et de MnCl [indice inférieur 2], les cinétiques de phosphorylation sont fortement biphasiques avec une phase rapide de phosphorylation suivie d'une phase plus lente de déphosphorylation. Ces résultats suggèrent que la liaison du Mg[indice supérieur 2+] ou du Mn[indice supérieur 2+] au domaine périplasmique de PhoQ inhibe l'activité d'autophosphorylation. L'instabilité de [[indice supérieur 32]P]-phospho-PhoP en présence de membranes contenant PhoQ indique que PhoQ possède également une activité phosphatase. Cette activité phosphatase est stimulée par des concentrations croissantes de MgCl [indice inférieur 2]."--Résumé abrégé par UMI