Caractérisation des activités catalytiques du récepteur histidine kinase phoQ de Salmonella enterica serovar Typhimurium et des mutants de la position 179

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Publication date
2001Author(s)
Montagne, Martin
Abstract
L'activité histidine kinase du récepteur PhoQ de Salmonella enterica serovar Typhimurium est régulée par la concentration extracellulaire de Mg[indice supérieur 2+]. Il semble que le Mg[indice supérieur 2+] soit le ligand physiologique de PhoQ. Dans cette étude, nous avons caractérisé in vitro et in vivo la régulation des activités catalytiques de PhoQ par le Mg[indice supérieur 2+]. Nous avons également voulu identifier les résidus du domaine périplasmique de PhoQ impliqués dans la liaison du Mg[indice supérieur 2+]. Des études in vitro ont montré que l'autophosphorylation de PhoQ nécessite la présence d'ATP et d'ions divalents tels que le Mg[indice supérieur 2+], le Mn[indice supérieur 2+], le Ca[indice supérieur 2+] et le Ba[indice supérieur 2+]. Cependant, à des concentrations supérieures à 0,1mM de MgCl [indice inférieur 2] et de MnCl [indice inférieur 2], les cinétiques de phosphorylation sont fortement biphasiques avec une phase rapide de phosphorylation suivie d'une phase plus lente de déphosphorylation. Ces résultats suggèrent que la liaison du Mg[indice supérieur 2+] ou du Mn[indice supérieur 2+] au domaine périplasmique de PhoQ inhibe l'activité d'autophosphorylation. L'instabilité de [[indice supérieur 32]P]-phospho-PhoP en présence de membranes contenant PhoQ indique que PhoQ possède également une activité phosphatase. Cette activité phosphatase est stimulée par des concentrations croissantes de MgCl [indice inférieur 2]."--Résumé abrégé par UMI