Mise au point d'une méthode de RT-PCR et d'hybridation in situ afin de mesurer les niveaux d'expression des convertases à proprotéines de type subtilisine (SPCs) dans l'arthrite expérimentale chez le rat

Abstract

Nous savons qu'une famille d'endoprotéases à sérine, les convertases à proprotéines de type subtilisine (SPCs), est responsable du clivage de plusieurs de ces facteurs et pourrait donc contribuer à l'évolution de la maladie en activant des médiateurs d'importance majeure. En effet, par l'étude plus approfondie des substrats connus et potentiels des convertases à proprotéines dans le contexte de l'arthrite, il est convenable de leur attribuer un rôle dans l'inflammation ainsi que dans la dégradation de la matrice extracellulaire et des composants majeurs du tissu conjonctif de l'articulation. À partir de ces hypothèses, nous avons décidé de vérifier le rôle de certaines SPCs (furine/SPC1, PACE4/SPC4 et PC6B/SPC6B) dans le développement de l'arthrite expérimentale en évaluant les niveaux d'expression des gènes encodant ces enzymes au niveau de la membrane synoviale. Utilisant un modèle expérimental d'arthrite induite au collagène de type II bovin chez le rat, nous avons donc mis au point une méthode de RT-PCR semi-quantitative permettant de mesurer les niveaux d'ARNm de ces enzymes ainsi que de certains de leurs substrats au niveau de la membrane synoviale, selon l'évolution de la pathologie. De plus, par la technique d'hybridation in situ , nous avons tenté de localiser l'expression de ces enzymes à l'intérieur de l'articulation du genou.