Caractérisation de la région promotrice du gène CYP11B2 de hamster

Abstract

La biosynthèse de l'aldostérone dans la zone glomérulée du cortex surrénalien requiert l'action séquentielle de plusieurs enzymes. L'étape finale de cette synthèse est contrôlée chez certaines espèces par l'enzyme P450 11ß-hydroxylase, exprimée par le gène CYP11B1 (vache, porc et mouton), alors qu'elle est plutôt contrôlée chez d'autres espèces par l'enzyme P450 aldostérone synthase, exprimée par le gène CYP11B2 (rat, souris, hamster et humain). Les effets de l'angiotensine II (AII), du KCl et du dBt cAMP sur l'expression d'un plasmide contenant les 486 premières paires de bases (pb) de la région 5 ' non codante du gène CYP11B2 de hamster ont été étudiés dans la lignée cellulaire NCI-H295. Dans l'ensemble, ces résultats démontrent que l'élément Ad1 est essentiel pour l'activité promotrice du gène CYP11B2 de hamster. L'élément Ad2 et la région -114/-124 sont également requis pour l'obtention d'une activité basale maximale alors que la présence d'Ad2 est nécessaire pour obtenir une induction maximale en réponse au dBt cAMP et au KCl dans les cellules NCI-H295. De plus, l'utilisation de la nifédipine, un antagoniste des canaux calciques, a permis de démontrer la participate de ces canaux dans la régulation de l'activité transcriptionelle de CYP11B2 dans les cellules NCI-H295. La nifédipine a partiellement bloqué les effets stimulateurs de l'AII, du dBt cAMP et de la forskoline sur l'activité transcriptionelle du promoteur de type sauvage de -486 pb, alors qu'elle a complètement bloqué les effets stimulateurs du KCl. Ces résultats démontrent donc l'implication des canaux calciques dans la régulation de la transcription du gène CYP11B2 par le KCl, et leur implication partielle dans les mécanismes de régulation de l'AII, du dBt cAMP et de la forskoline sur ce même gène.