Analyse de l'expression des chaînes du collagène de type IV au cours du développement de l'intestin humain identification d'un second réseau de collagène IV

Abstract

Le collagène de type IV est un composé majeur des lames basales. La famille du collagène IV est composée de six chaînes polypeptidiques ([alpha]1 à [alpha]6) qui sont génétiquement distinctes mais dont la structure est semblable. Dans la présente étude, nous avons analysé l'expression des chaînes [alpha]5(IV) et [alpha]6(IV) au cours du développement et de la différenciation dans l'intestin. Par immunofluorescence indirecte, les chaînes [alpha]5(IV) et [alpha]6(IV) sont co-exprimées au niveau du domaine basolatéral des cellules épithéliales et la chaîne [alpha]5(IV) est détectée au niveau du mésenchyme de l'intestin foetal. Au cours du développement intestinal, l'expression de la chaîne [alpha]5(IV) est régulée négativement alors que celle de la chaîne [alpha]6(IV) est maintenue au niveau de l'intestin adulte. L'expression des chaînes [alpha]5(IV) et [alpha]6(IV) diffère au cours de la différenciation des cellules Caco-2/15 (lignée de cellules épithéliales intestinales). Par analyse Northern, le transcrit de la chaîne [alpha]5(IV) présente une expression maximale peu après la différenciation des cellules et on observe, par transfert Western, une accumulation de sa protéine au cours de la différenciation de la lignée cellulaire Caco-2/15. Les niveaux protéiques de la chaîne [alpha]6(IV) demeurent stables peu importe le stade de confluence. In vitro, les chaînes [alpha]5(IV) et [alpha]6(IV) sont exprimées par les cellules épithéliales et mésenchymateuses, suggérant une double origine de ces chaînes déposées au niveau de la lame basale épithéliale. Finalement, ces données indiquent que la lame basale épithéliale de l'intestin contiendrait quatre chaînes de collagène IV. En plus du collagène classique ([alpha]1(IV))[indice inférieur 2][alpha]2(IV), un second réseau de collagène IV compose des chaînes [alpha]5 et [alpha]6 serait présent.--Résumé abrégé par UMI.