Contribution à une intégration de la programmation procédurale et de la programmation logique : le langage COP

Abstract

Les cellules sont spécialisées dans la biosynthèse d'une variété de molécules destinées à la sécrétion. Pour assurer cette fonction, la cellule pancréatique possède différents organites intracellulaires. Chacun de ces organites remplit une tâche bien précise dans la voie de la sécrétion. La majorité de ces organites ont été isolés est étudiés individuellement par différentes méthodes analytiques afin de mieux comprendre leur rôle physiologique dans les cellules pancréatiques. Récemment, des méthodes cytochimiques ont permis la mise en évidence des structures tubulaires dans des cellules pancréatiques. Ces structures ont été révélées par des méthodes cytochimiques et de cryosubtitution et nommées SLT , Snake-like tubules, qui signifie structures serpentiformes. Plusieurs évidences ont montré que les SLT pancréatiques sont impliquées dans l'endocytose probablement comme des endosomes précoces. Le but principal de projet était d'établir une méthode de purification des SLT et d'étudier leur rôle possible dans l'endocytose. Au cours de la première partie du projet, nous avons purifié à partir des cellules pancréatiques une fraction relativement enrichie en SLT. L'enrichissement de cette fraction est déterminé par l'activité de la ?-NADPHase, un marqueur potentiel des SLT. La même méthode a été utilisée pour purifier les mêmes structures à partir d'acini incubés in vitro avec la HRP, horse radish peroxidase, à différents intervalles de temps. Le dosage biochimique de cette enzyme indique que la fraction de SLT se comporte comme des endosomes précoces. Au cours de la deuxième partie du projet, nous avons purifié une fraction enrichie en endosomes avec la méthode de déplacement de la densité en présence de la DAB (3,3- diaminopenzidine tetrahydrochloride). Cependant, cette fraction ne présente pas une activité de la ?-NADPHase du même ordre que la HRP, marqueurs des SLT et des endosomes, respectivement. Deux explications de ces résultats sont possibles: soit les SLT et les endosomes sont des organites différents et indépendants, soit la ?-NADPHase n'est pas un marqueur spécifique pour différencier les endosomes des SLT. Cette dernière explication s'avère plausible du fait que les méthodes cytochimiques ont montré que les SLT sont des endosomes capables d'incorporer les marqueurs exogènes comme la HRP.