Influence des procédures d'explantation sur les cellules ventriculaires de rats nouveau-nés en culture

Abstract

Les propriétés morphologiques et électrophysiologiques du ventricule isolé de rat nouveau-né sont étudiées avant et après la mise en culture. Les cellules en culture sont dissociées, soit avec trypsine, soit en collagénase avec ou sans agitation mécanique et étudiées 10 heures, et 3 jours et plus après l'explantation. Les cellules du ventricule isolé montrent une organisation structurale importante caractérisée par des myofibrilles arrangées en parallèle et elles possèdent une électrogénèse déterminée par un courant rapide sodique sensible à la tétrodotoxine (TTX), un bloqueur spécifique du canal sodique rapide. Dix heures après la mise en culture, l'électrogénèse de ces cellules est toujours déterminée par un courant entrant rapide, sauf dans les préparations dissociées en collagénase avec agitation mécanique qui sont dépolarisées et inexcitables, cependant les myofibrilles ne sont plus arrangées en parallèle, mais dispersées d'une façon alléatoire à l'intérieur de la cellule. Quelques jours après l'explantation, et indépendamment de la méthode de dispersion utilisée, toutes les préparations montrent des myofibrilles parallèles avec des sarcomères bien différenciés, une organisation similaire à celle observée dans le ventricule isolé avant l'explantation. Ces cellules montrent un potentiel d'action à phase de montée lente, insensible à la TTX et de l'activité spontanée. Nos résultats indiquent que la désorganisation des myofibrilles, observée peu de temps après la mise en culture, ne réflète pas un endommagement cellulaire. De plus, la trypsine et la collagénase ne semblent pas avoir d'effets différents sur les propriétés morphologiques et électrophysiologiques de ces cellules en culture et le traitement à la trypsine paraît mieux préserver les préparations que celui à la collagénase, en présence d'agitation mécanique. L'agitation mécanique semble donc être un facteur important qui détermine l'état des cellules myocardiques en culture.