Culture organotypique d'intestin de souris fœtale: études morphologique, cytochimique et biochimique

Abstract

Nous avons observé en microscopie la morphogénèse et l'ultrastructure du duodénum de souris foetales âgées de 15 à 17 jours. Nos observations montrent (1) qu'il y a une maturation graduelle rapide et, (2) de même qu'un gradient de différenciation des cellules absorbantes dans une même villosité. Sur le plan enzymatique, les activités de la maltase, la lactase, la glucoamylase, la phosphatase alcaline et la l-glutamyl-transpeptidase augmentent avec l'âge. Notre méthode de culture organotypique nous a permis de garder en culture des explants de duodénum jusqu'à 72 heures avec une bonne préservation. Morphologiquement l'épithelium intestinal, demeure à un stade peu différencié et il n'y a pas de villogénèse lorsque les explants sont cultivés dans le milieu de base (Trowell T-8). Lorsque ce milieu de culture est additionné d'hormones, nommément: l'insuline à action rapide et lente, l'hydroxycortisone et la sérotonine, on n'a pu observer de changements importants. Lorsque le milieu de culture Trowell T-8 est additionné de liquide amniotique, nous avons observé (1) la formation de villosités et (2) une plus grande différenciation des entérocytes. Nous avons mis en évidence par des techniques cytochimiques l'activité de la G-6-Pase, des phosphatases alcaline et acide, ainsi que celle de la catalase. Les activités enzymatiques de la maltase, la lactase, la gLucoamylase, la phosphatase alcaline et la l-glutamyl—transpeptidase après 48 h. de culture restent au niveau des activités enzymatiques retrouvées dans le duodénum d'embryons de 15 jours et ce même après avoir ajouté au milieu de culture Trowell T-8 des hormones et du liquide amniotique.