Construction de plasmides recombinants contenant les régions encodant différents antigènes du virus du plyome et du virus simien 40

Abstract

Au cours de ce travail, nous nous sommes intéressés aux rôles de différents antigènes tumoraux. Plus particulièrement, nous avons voulu voir si l'antigène petit t du virus du polyome pouvait stimuler la transformation cellulaire induite par l'antigène grand T du virus SV40. Nous avons construit un plasmide recombinant hybride comportant la séquence de DNA codant pour l'antigène grand T de SV40 ainsi que la région codant l'antigène petit t du virus du polyome. Nous avons entrepris l'étude des propriétés biologiques du recombinant en injectant le DNA à des rats nouveau-nés et en transformant des cellules de rat en culture par la technique de transfection in vitro au chlorure de calcium. Nous avons également modifié par mutagénèse in vitro un plasmide recombinant de façon à inactiver les antigènes petit t et T moyen sans inactiver l'antigène grand T. Ce mutant artificiel du virus du polyome se comporte comme les mutants "host range" naturels NG18 et NG59 en ce sens qu'il ne transforme pas les cellules de rat in vitro. Nous avons ensuite rétabli les propriétés oncogènes du DNA en lui insérant la séquence codant pour l'antigène grand T de SV40. Nous avons isolé une dizaine de lignes cellulaires établies par ce recombinant bipartite, et il serait intéressant de voir si ces cellules transformées par le génome de SV40 expriment l'antigène grand T du virus du polyome. Dans la dernière partie de notre travail, nous avons cloné le génome de différents mutants naturels du virus du polyome tels que le mutant d145 et les mutants "host range" NG18 et NG59.