Méthode de dosage de PACE4 pour l’évaluation de son potentiel comme biomarqueur du cancer de la prostate

Abstract

L’utilité clinique du dosage de l’antigène prostatique spécifique (APS) est maintenant remise en question pour le dépistage du cancer de la prostate (CaP) puisque ce biomarqueur est non spécifique au CaP. Ce test de dépistage demeure tout de même fréquemment utilisé en clinique par manque de meilleurs biomarqueurs. De plus, le manque d’outil pronostique pour ce type de cancer est un problème clinique auquel il est impératif de s’attaquer. Les travaux faits par notre groupe de recherche fournissent plusieurs évidences appuyant l’hypothèse que l’isoforme consensuelle de PACE4 (PACE4-CtCons) ainsi qu’une isoforme récemment découverte dont l’extrémité C-terminale est distincte (PACE4-CtAlt) pourraient représentées des biomarqueurs utiles du CaP. Cependant, aucun essai biochimique n’est disponible pour doser précisément les niveaux de ces deux isoformes dans les prélèvements sanguins ou dans l’urine. Un essai d’immunoprécipitation couplée à une analyse de spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) adaptée du mode multiple reaction monitoring (pseudoMRM) a ainsi été développé. Tout d’abord, 6 transitions (2 par peptides) ont été sélectionnées et optimisées pour quantifier les peptides MLELSAPELEPPK et NVVVTILDDGIER, communs aux deux isoformes, ainsi que le peptide LETFWVVTTGR, unique à PACE4-CtAlt avec des limites de détection à des concentrations inférieures à 5 nM. Pour l’essai, trois anticorps ont été produits (anti-domaine P, anti-CtCons et anti-CtAlt) et la spécificité a été validée. L’essai a été employé dans l’urine et dans les plasmas de patients atteints d’un CaP. PACE4-CtAlt n’a été observée dans aucun des échantillons cliniques analysés durant cette étude. Pour ce qui est de PACE4-CtCons, il n’a été détecté que dans les prélèvements sanguins. Les niveaux de PACE4-CtCons ont ensuite été déterminés dans 33 prélèvements sanguins avec l’anti-domaine P pour comparer des patients atteints d’un CaP (N = 25) et des échantillons contrôles (N = 8). Il y aurait 2,2x plus de PACE4-CtCons dans le sang des patients atteints d’un CaP que chez les patients contrôles. En somme, il est possible de conclure que les niveaux sanguins de PACE4-CtCons sont plus élevés chez des patients atteints d’un CaP que chez les patients sains, mais qu’il n’y aurait pas de PACE4 dans l’urine. Aussi, un essai plus sensible comme l’ELISA est nécessaire pour doser les niveaux de PACE-CtAlt dans ces prélèvements si cette isoforme peut effectivement atteindre le sang.