Utilisation de la technique de superfusion en cascade pour le dosage de l'activité réninique du plasma

Abstract

La quantification de la rénine endogène est basée sur le taux de formation d'angiotensine du plasma en incubation. Une foule de techniques complexes et longues ont été utilisées précédemment pour cet essai. Le but de nos travaux a été de mettre au point une technique de dosage de l'activité réninique du plasma qui soit à la fois simple, spécifique et efficace afin qu'elle puisse servir régulièrement en clinique et en laboratoire. Le côlon ascendant de rat avait été décrit comme un tissu très sensible à l'angiotensine, nous l'avons donc utilisé pour les essais biologiques dans des bains de superfusion en cascade mis au point par Gaddum (1953) et avons fait les observations suivantes: 1. La contraction du côlon de rat peut être rendue spécifique à l'angiotensine en infusant avec la solution de superfusion une mixture d'inhibiteurs contenant l'oxprénolol et la phentolamine pour bloquer les catécholamines, l'atropine pour bloquer l'acétylcholine et autres cholinomimétiques, le méthysergide pour inhiber la sérotonine et enfin la polyphlorétine phosphatée (PPP) pour contrer l'action des prostaglandines. 2. Le diisopropylfluorophosphate (DFP) a été utilisé efficacement pour bloquer les angiotensinases du plasma. L'enzyme de conversion n'est toutefois pas inhibé par cet organo-phosphate. 3. Les analogues de l'angiotensine II ([8-D-Phe]-ATII, [8-L-AIa]-ATII, [8-Leu]-ATII, [1-Sar, 8-Leu]-ATII, [8-Gly]-ATII) se sont révélés être d'excellents et spécifiques inhibiteurs de l'angiotensine. Ils ont été utilisés pour fournir une preuve finale et absolue que la réponse du côlon à un échantillon de plasma en présence de la mixture d'inhibiteurs ne peut être que due à l'angiotensine. 4. La technique d'extraction que nous avons mise au point est simple et rapide (30 - 40 minutes) et permet des recouvrements de l'ordre de 88%. De plus, la technique de superfusion en cascade implique le prélèvement de très petites quantités de sang du patient; cinq ml de sang suffisent pour une détermination. 5. Les valeurs de l'activité réninique de plusieurs échantillons de plasma, provenant d'humains normaux ou malades, de chiens en hémorragie et de pigeons ayant reçu divers traitements, ont été obtenues. Elles sont comparées avec les valeurs obtenues par d'autres méthodes.