Étude du système inactivateur de la renine dans le plasma de rat

Abstract

Une nouvelle méthode d'extraction de la rénine, évitant des acidifications fortes et des traitements à base de concentrations élevées de sels, a été appliquée à la purification partielle des rénines de plusieurs espèces. L'utilisation d'une colonne CM cellulose a permis de séparer des fractions contenant les angiotensinases (fraction I) ou la rénine (fraction II). Les activités de rénines partiellement purifiées ont été mesurées "in vitro" en incubant l'enzyme avec de l'angiotensinogène obtenu selon la méthode de Haas et Goldblatt (17) ou celle de Schaechtelin et coll. (39). La première de ces méthodes a fourni des résultats excellents pour l'angiotensinogène humain: par contre, la méthode de Schaechtelin et coll. a permis d'obtenir des préparations d'angiotensinogène de chien, lapin et rat, dépourvues d'angiotensinases. Les activités des préparations de rénines ont été standardisées en appliquant une nouvelle méthode de standardisation de la rénine "in vitro". Plutôt que de comparer les différentes préparations de rénines sur la pression artérielle du chien non-anesthésié, nous avons incubé "in vitro", en présence d'angiotensinogène de chien, les rénines obtenues dans notre laboratoire et celles fournies par le laboratoire du Dr E. Haas. Cette comparaison a permis d'établir qu'il y a une correspondance très bonne entre le dosage "in vivo" et le dosage "in vitro" en utilisant l'angiotensinogène de chien. Des préparations de rénines, ainsi standardisées, ont servi à l'étude du facteur inactivant la rénine, dans le plasma de rat. Nos résultats démontrent que la rénine est stable à des pH entre 6.5 et 8.9 lorsqu'elle est incubée "in vitro" avec de la solution saline isotonique. Par contre, 30 - 40% de la rénine incubée avec du plasma de rat "in vitro" est inactivée dans 1 heure et plus de 50% dans 2 heures. Cette perte d'activité est probablement due a une dégradation de l'enzyme par un facteur plasmatique. Ce facteur est apparemment résistant à la dialyse (72 heures à 0° C contre un tampon phosphate 0.01 M à pH 7.0) et à la lyophilisation. Par contre, la filtration à travers colonne Sephadex G-100 et G-200 ainsi que la précipitation des protéines plasmatiques avec le glycinate de zinc entraînent une perte presque totale du facteur inactivant la rénine. Ce facteur n'est pas contenu dans des extraits de foie.