Interaction de l'actine avec les granules de sécrétion du pancréas exocrine de rat

Abstract

L'objectif de ce travail était de démontrer que les microfilaments, principalement concentrés à l'apex de la cellule acinaire pancréatique, se lient aux granules de sécrétion. Nous avons envisagé ce problème selon deux approches. Nous avons d'abord démontré la distribution des microfilaments principalement constitués d'actine à l'aide d'une technique d'irnrnunocytochimie utilisant le complexe protéine A-or comme marqueur. D'autre part, nous avons déterminé les facteurs pouvant régulariser l'interaction de l'actine aux granules de zymogènes. L'immunocytochimie nous a révélé que l'actine se distribue dans plusieurs sites intracellulaires. Nous avons noté un marquage irnrnunocytochimique à l'apex de la cellule, au niveau des microvillosités et au niveau du réseau de microfilaments bordant la membrane apicale, appelé "terminal web". Nous avons également remarqué que des microfilaments s'associent à la membrane des granules de zymogènes. L'actine se rencontre aussi dans le contenu du granule, dans les mitochondries et dans le noyau. Cette technique de microscopie nous a donc permis de démontrer une association des microfilaments aux granules de sécrétion. Suite à ces résultats, nous avons déterminé in vitro l'effet de certains facteurs impliqués dans le couplage de la stimulation et de la sécrétion sur la liaison de l'actine aux granules de zymogènes. Il nous a d'abord fallu mettre au point une technique de marquage, soit l'ioduration de l'actine, pouvant nous permettre de quantifier la liaison de l'actine aux vésicules de sécrétion. L'association de l'actine aux grains de zymogènes semble être influencée par deux facteurs, soit le pH du milieu, ainsi que le calcium. Nos travaux supportent donc l'hypothèse d'un rôle des microfilaments dans la sécrétion et ouvrent la voie à d'autres travaux qui per­ mettront de mieux définir la fonction des microfilaments dans les étapes menant à l'exocytose des protéines de sécrétion.