Focalisation isoélectrique des protéines du suc pancréatique du rat

Abstract

Cette recherche fut entreprise dans le but de doter la physiologie pancréatique d'une micro-méthode pour séparer et analyser en une seule opération, les protéines du suc pancréatique du rat. Nous avons utilisé, pour atteindre nos fins, la focalisation isoélectrique dans un gel de polyacrylamide dont la composition comprend 3.45% d'acrylamide, 0.14% de bis-acrylamide, de l'urée 8M et 2% d'ampholine. La séparation obtenue, après 8 heures de focalisation sous un voltage maximum de 300 volts, produit un électrophorégramme de 26 bandes différentes par leur p6int isoélectrique. L'identification des protéines et l'étude de leurs caractéristiques enzymologiques indiquent que le suc pancréatique du rat contient deux amylases, situées en position 11 et 13 sur l'électrophorégrannne au pH 7.6 et 7.4, amylases identiques quant à leur activité spécifique sur l'amidon et sur le glycogène; en position 14 sur l'électrophorégramme on retrouve à pH 6.8, une lipase atteignant son activité maximale en absence de sels biliaires; suit en position 16 à pH 6.3, une procarboxypeptidase A, en position 24 à pH 5.2, un chymotrypsinogène A, et en position 25 à pH 4.9 un inhibiteur de la trypsine. Nous avons appliqué cette méthode de séparation à l'étude de l'adaptation des enzymes pancréatiques à différents régimes alimentaires. Nos observations, à l'aide de l'incorporation des précurseurs radio-actifs, indiquent qu'on peut distinguer par focalisation isoélectrique, le suc pancréatique d'un rat adapté à un régime glucidique de celui d'un rat adapté à un régime protéique. Nous démontrons une excellente corrélation entre les dosages enzymatiques et la mesure de l'incorporation d'acides aminés radio-actifs dans les amylases et dans le chymotrypsinogène.