Étude des interactions épithélio-mésenchymateuses dans un système de co-culture de cellules intestinales humaines

Abstract

Des co-cultures composées uniquement de cellules intestinales humaines ont été générées dans le but d'étudier les interactions épithélio-mésenchymateuses. Les cellules épithéliales et mésenchymateuses sont les Caco-2/15 et les HIM (cellules mésenchymateuses intestinales humaines) respectivement. Les cellules HIM ont été obtenues d'un jéjunum fœtal humain de 18 semaines. Elles ont été caractérisées en analysant l'expression de marqueurs cytosquelettiques des fibroblastes et des cellules musculaires lisses soit la vimentine, l'?-actine de muscle lisse, la desmine et la myosine. Elles sont comparables aux myofibroblastes péricryptaux du grêle adulte. Dans les co-cultures, le maintien des caractéristiques cytosquelettiques des deux types cellulaires a été observé, les cellules Caco-2/15 exprimant toujours la cytokératine 18 et 19. La présence des deux types cellulaires est nécessaire pour la déposition d'une lame basale. La présence des principaux constituants de la lame basale épithéliale intestinale a été analysée. Le collagène de type IV et la ténascine proviennent du compartiment mésenchymateux, la laminine et la fibronectine proviennent d'une contribution à la fois des Caco-2/15 et des HIM. Il y a apparition d'expression et de déposition de protéoglycan de type héparan— sulfate (HSPG) par les cellules épithéliales en co-cultures seulement. Ceci suggère qu'il existe des interactions épithélium-mésenchyme spécifiques dans lesquelles les cellules HIM modulent l'expression du HSPG par les cellules épithéliales. La lame basale retrouvée dans les co-cultures a la même composition que celle retrouvée dans le jéjunum fœtal humain. A la lumière de ces résultats, le modèle de co-culture de Caco-2/15 - HIM est un modèle valable pour l'étude in vitro de la formation de la lame basale dans le contexte des interactions épithélio-mésenchymateuses intestinales.