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dc.contributor.advisor[non identifié]
dc.contributor.authorLaprise, Marie-Hélène
dc.date.accessioned2018-04-06T20:03:05Z
dc.date.available2018-04-06T20:03:05Z
dc.date.created1995
dc.date.issued1995
dc.identifier.isbn0612094901
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11143/12063
dc.description.abstractLe facteur de transformation de type bêta 1 (TGF[bêta]1) est une cytokine homodimérique de 25 kDa impliquée dans la régulation de la croissance et de la différenciation cellulaire. Cet agent pro-inflammatoire est synthétisé par divers types cellulaires tels que les plaquettes, les macrophages, les lymphocytes, les cellules synoviales et les ostéoblastes. La formation du TGF débute par la synthèse du pré-pro-TGF un polypeptide de 390 acides aminés. Suite au clivage du peptide signal, ce précurseur est clivé au site Arg275-His- Arg-Arg278, permettant ainsi le relâchement du TGF mature (112 acides aminés). La protéase responsable de ce clivage est demeurée inconnue jusqu'à ce jour. Certains résultats suggèrent que la maturation du pro-(TGF[bêta]1) s'effectue lors de son passage dans le trans-Golgi. Puisque cette séquence de clivage correspond aux motifs consensus (Arg-X-Arg/Lys-Arg) de l'endoprotéase furine et que celle-ci se trouve ancrée dans la membrane bi-lipidiques du trans-Golgi, nous avons étudié l'implication de la furine dans la maturation du précurseur du (TGF[bêta]1). La furine est une sérine protéase de la famille des subtilisines impliquées dans la maturation de divers précurseurs protéiques tels que le gp 160 du VIH-1, le pro-récepteur de l'insuline et le pro-NGF?. Dans un premier temps, pour déterminer si le clivage du pro-TGF?1 est médié par l'endoprotéase furine, le précurseur du (TGF[bêta]1) provenant d'une lignée cellulaire CHO a été incubé pendant 3 heures en présence de surnageant provenant des cellules BSC 40 infectées par le virus vaccinia (VV) de type sauvage (VV:WT) ou le virus recombinant contenant l'ADNc codant pour une forme soluble de la furine (VV:hFUR713t). Le clivage du précurseur a été visualisé par buvardage de type Western à l'aide d'anticorps polyclonaux dirigés soit contre le précurseur complet, le (TGF[bêta]1) mature, ou la pro-région. Suite à la digestion enzymatique, nous avons observé que la bande de 55 kDa correspondant au pro-TGF monomérique était convertie en une bande de 44 kDa (pro-région) et en une bande de 12,5 kDa ((TGF[bêta]1) mature). Le traitement du pro-(TGF[bêta]1)1 avec la furine provoque une augmentation (5 fois) de la production de TGF?1 biologiquement actif, tel que démontré à l'aide d'un essai d'inhibition de croissance avec les cellules Mv 1 lu. De plus, l'implication de la furine lors de la maturation du (TGF[bêta]1) a été confirmée à l'aide d'un inhibiteur de la furine, le DEG-Arg-Val-Lys-Arg-CH2Cl. Par la suite, des cellules LoVo (qui ont une activité furine déficiente) ont subi des co-infections avec un virus vaccinia recombinant codant pour le précurseur du (TGF[bêta]1) (VV:hTGF?1) et avec le virus vaccinia recombinant exprimant la furine (VV:hFUR). L'analyse des surnageants, obtenus post-infection, démontre un clivage du précurseur du (TGF[bêta]1) par la furine. Conjointement, nos résultats démontrent que le précurseur du (TGF[bêta]1) peut-être clivé par la furine et ainsi favoriser le relâchement du (TGF[bêta]1) mature.
dc.language.isofre
dc.publisherUniversité de Sherbrooke
dc.rights© Marie-Hélène Laprise
dc.titleMaturation du précurseur du facteur de transformation de type Bêta 1 (TGF[bêta]1) par la convertase, furine
dc.typeMémoire
tme.degree.disciplinePharmacologie
tme.degree.grantorFaculté de médecine et des sciences de la santé
tme.degree.levelMaîtrise
tme.degree.nameM. Sc.


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