Caractérisation immunologique et immunochimique d'un antigène de la muqueuse de l'intestin grêle de souris et de cobaye

Abstract

Des cobayes ont été immunisés avec un antigène extrait de de la muqueuse de l'intestin grêle (PI) isologue, de même que des souris consanguines avec PI isologue ou autologue. Cet antigène est émulsifié au préalable dans de l'adjuvant complet de Freund (ACF). Des niveaux détectables d'anticorps anti-PI sont observés après deux doses de l'immunogène. Des études plus approfondies chez des souris consanguines ont révélé un degré de susceptibilité lié à l'haplotype respectif de ces souris. Des souris BALB/c (H-2d) et C57bl/6 (H-2b) ont été immunisées avec une ou deux doses de PI isologue ou autologue. Dans les deux souches de souris, une seule dose de PI induit une synthèse marginale d'anticorps anti-PI, révélé par ELISA. Les souris BALB/c ayant reçu deux doses de PI produisent des niveaux détectables d'anticorps anti-PI, à différence des souris C57bl/6 immunisées de la même façon. De plus, les souris BALB/c immunisées avec du PI autologue révèlent une réponse humorale similaire au groupe de souris BALB/c alloimmunisées. Ces résultats supportent la possibilité d'un contrôle génétique de la susceptibilité des souris BALB/c et C57bl/6 à répondre à l'allo- ou à l'autoimmunisation avec PI. La synthèse d'anticorps anti-PI chez les souris BALB/c susceptibles et C57bl/6 résistantes, semblent en relation avec la dose et le nombre d'injections de l'immunogène. L'électrophorèse SDS-PAGE de PI, foie et rein de cobaye ou de souris, révèle deux bandes polypeptidiques spécifiques à PI de cobaye ayant des poids moléculaires (P.M.) de 30 Kd et 46 Kd et deux bandes spécifiques à PI de souris possédant des P.M. inférieurs à 17 Kd. Des sérums hétérologues de lapins anti-PI de cobaye et de souris, et la fraction globulinique de ces sérums, ont démontré peu de réactions croisées entre les PI de sources xénogéniques, tandis que certains degrés de réactions croisées sont observées entre PI et les extraits salins de foie et de rein isologues, lors de l'analyse par ELISA. Des absorptions de l'anti-PI de cobaye et de souris avec des lyophilisats d'organes isologues ont permis de démontrer la spécificité face à l'antigène PI, en éliminant les réactions croisées avec ces extraits d'organes. L'analyse par immunotransfert du sérum hétérologue anti-PI de cobaye absorbé avec des lyophilisats d'organes isologues, de la fraction globulinique de ce sérum, ainsi que des sérums isologues, incubés avec PI de cobaye et avec des extraits salins de foie et de rein isologues révèlent deux bandes spécifiques à PI de 30 et 46 Kd, tel qu'identifiées par SDS-PAGE. L'analyse par immunotransfert du sérum hétérologue anti-PI de souris absorbé ou non, de la fraction globulinique, de même que des sérums isologues et autologues de souris BALB/c, révèle deux bandes Pl-spécifiques clairement identifiées par SDS-PAGE, ayant des P.M. de 10 et 8 Kd.