• Français
    • English
  • Français 
    • Français
    • English
  • Login
View Document 
  •   Savoirs UdeS Home
  • Médecine et sciences de la santé
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires
  • View Document
  •   Savoirs UdeS Home
  • Médecine et sciences de la santé
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires
  • View Document
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Browse

All of Savoirs UdeSDomains & CollectionsBy Issue DateAuthorsTitlesSubjectsDirectorsThis CollectionBy Issue DateAuthorsTitlesSubjectsDirectors

My Account

Login

Statistics

View Usage Statistics

Recombinaison de la molécule d'ADN hybride RmI à l'aide d'extraits de cellules de souris

Thumbnail
View/Open
Charest_Andre_MSc_1989.pdf (26.44Mb)
Publication date
1989
Author(s)
Charest, André
Show full document record
Abstract
RmI est une molécule d'ADN résultant de l'excision du génome viral résidant dans une lignée de cellules de souris transformée par un mutant thermosensible du virus du polyome (Py). RmI contient un génome viral complet et une réitération de séquence virale de 182 pb, en plus de 1628 pb d'ADN de souris. Si on introduit par transfection cette molécule dans la cellule de souris, il y a recombinaison entre les répétitions virales pour générer un génome complet de Py. Ce processus requiert, directement ou indirectement, la présence de l'antigène grand T (LT). Dans le but de faire la lumière sur les facteurs nécessaires à cet événement de recombinaison, nous avons tenté de mettre au point un système de recombinaison acellulaire qui nous permette de contrôler et de définir les paramètres impliqués. Nous nous sommes servis d'extraits de cellules de souris non-infectées ou infectées par un vecteur vaccinal recombinant qui véhicule le gène du LT de Py sous la dépendance du promoteur du gène de la thymidine kinase. Le substrat de recombinaison est le plasmide pI-1. Celui-ci contient les séquences de RmI clonées au site Bam HI du plasmide pBR322. La faible quantité de produit formé pendant la réaction n'en permet pas la détection directe. Nous avons donc utilisé la technique dite de PCR ("polymerase chain reaction") pour en augmenter la quantité. Nous avons ainsi réussi à démontrer de la recombinaison survenant dans des conditions où la réplication du substrat n'est pas autorisée. Cette réaction nécessite du Mg2+ et de l'ATP. Elle peut se réaliser en l'absence de la protéine LT puisque son produit est formé grâce à des extraits de cellules non infectées ne contenant aucune protéine spécifique à Py. Le ou les facteurs protéiques impliqués sont d'une grande thermostabilité. Ce système in vitro nous permettra éventuellement d'élucider les mécanismes mis en jeu lors de la recombinaison de l'ADN de Py dans les cellules de souris.
URI
http://hdl.handle.net/11143/12044
Collection
  • Médecine et sciences de la santé – Mémoires [1598]

DSpace software [version 5.4 XMLUI], copyright © 2002-2015  DuraSpace
Contact Us | Send Feedback
 

 


DSpace software [version 5.4 XMLUI], copyright © 2002-2015  DuraSpace
Contact Us | Send Feedback