Intégration de l'ADN du virus du polyome dans le génome de la souris : la cellule Cyp

Abstract

Les cellules Cyp sont des cellules d'embryons de souris transformées par le mutant ts-P155 du virus du polyome. A l'aide de régions cellulaires uniques contenues dans RmI et RmII, deux molécules hybrides véhiculant, en plus du génome viral, des séquences cellulaires adjacentes au provirus, nous avons isolé l'ADN homologue provenant du site chromosomique tel qu'il se présente avant intégration. Les résultats obtenus nous indiquent que l'insertion du génome de polyome ne s'est effectuée que dans un seul des allèles cellulaires, l'autre allèle ne subissant aucune altération décelable sur "blot" génomique. L'agencement des séquences de souris dans RmI et RmII réflète bien celui du chromosome porteur de l'ADN viral dans les cellules Cyp, mais non celui du chromosome avant intégration. Il s'est en effet produit une délétion importante d'ADN cellulaire dans la région où a eu lieu l'insertion virale. Les séquences des ADNs parents impliqués dans les deux événements de recombinaison, c'est-à-dire l'intégration du génome viral et la délétion dans l'ADN cellulaire, montrent une homologie de 2-4 bp au point de recombinaison dans les deux cas, mais aucune autre structure spécifique à proximité. L'ensemble des données recueillies nous suggèrent que si l'excision se produit dans les cellules Cyp via un mécanisme de recombinaison "site spécifique" (Sylla et al., 1984a), l'intégration du génome de polyome ayant conduit à l'obtention de ces cellules, s'est effectuée par recombinaison illégitime.