La lignée Cyp : Site cellulaire dans lequel s'est intégré l'ADN viral

Abstract

Les cellules Cyp sont des cellules d'embryons de souris transformées par le mutant ts-P155 du virus du polyome. Nous voulions retrouver dans le génome normal de souris la région cellulaire correspondant au seul site d'intégration de l'ADN de ts-P155 dans les cellules de la lignée Cyp. À l'aide des régions cellulaires uniques contenues dans RmI et RmII, deux molécules circulaires hybrides contenant des séquences du génome viral et de l'ADN cellulaire adjacent au provirus, nous avons isolé d'une génothèque de souris LMTK- la région d'homologie à ces séquences cellulaires, et qui serait la région de l'intégration. Après une première caractérisation de cette région par des enzymes de restriction et en la comparant avec les cartes des génomes intégrés et de l'ADN cellulaire de RmI et RmII, nous pouvons constater qu'il ne semble pas y avoir de réarrangements importants et/ou de délétions majeures dans la partie chromosomale située à gauche du provirus. Nous ne pouvons pas exclure tout réarrangement et/ou délétion dans la région du chromosome retrouvée à droite de l'insertion virale, n'ayant pas suffisamment d'information sur l'organisation de cette région après intégration du génome de ts-P155 dans les cellules Cyp. Nous avons observé quelques différences pour certains sites de restriction (Bg1I, HincdIII, AvaII...), une analyse plus détaillée de ces régions pourra nous dire s'il s'agit de modifications d'une seule paire de base dans chaque cas ou de changements beaucoup plus importants.