Mutagenèse dirigée des gènes T moyen et grand T du virus du polyome
Abstract
La délétion dl97 s'étend des nucléotides 1367 à 1396 et touche une région codante commune aux antigènes T moyen et grand T du virus du polyome. Le T moyen mutant MT97, affecté par cette délétion, perd son potentiel de transformation de lignées établies in vitro et son pouvoir de tumorigenèse in vivo. Le grand T mutant LT97, affecté par cette délétion, présente une efficacité accrue d'immortalisation et, contrairement au grand T sauvage, il est capable de complémenter le T moyen tant pour la transformation de cellules primaires in vitro que pour la tumorigenèse in vivo. Ce comportement pourrait s'expliquer par l'inaptitude de ce mutant à initier la réplication de l'ADN viral et, par conséquent, à exercer un effet cytopathique. Afin de mieux comprendre le rôle des antigènes tumoraux du virus du polyome dans la transformation néoplasique et la réplication de l'ADN viral, nous avons utilisé la technique de mutagenèse par boucle de délétion afin d'introduire des mutations ponctuelles dans la région du génome du virus du polyome correspondant à la délétion dl97. Nous avons construit 6 T moyen mutants, qui conservent tous leur potentiel de transformation, ainsi que 4 grand T mutants dont 3 sont incapables d'initier la réplication de l'ADN viral et présentent un potentiel accru d'immortalisation, ces deux propriétés paraissant liées.