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dc.contributor.advisorGibson, David
dc.contributor.authorLavigueur, Alain
dc.date.accessioned2018-01-16T21:25:35Z
dc.date.available2018-01-16T21:25:35Z
dc.date.created1985
dc.date.issued1985
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/11143/11683
dc.description.abstractLa présence d'un polymorphisme génétique entre différentes souches de souris est observée lorsque l'analyse des chaînes légères d'immunoglobulines de souris est effectuée par focalisation isoélectrique. Afin d'étudier ce polymorphisme, nous avons isolé un gène non-réarrangé de la région variable de la famille Vk-1 dans la souche de souris BALB/c. Une sonde Vk-1 provenant de la région 5' du gène V du myélome TEPC-105 a été utilisée pour le clonage moléculaire d'un fragment Bam HI de 8.5kb dans le bactériophage ?L47.1 en construisant une bibliothèque de phages recombinants à partir d'ADN de souris BALB/c enrichi pour le fragment désiré. Après purification de 2 clones positifs par hybridation in situ, un fragment recombinant a été sous-cloné dans le plasmide pBR 322 afin d'établir une carte de restriction avec les enzymes Ava I, Bam HI, Bgl II, Cla I, EcoRI, Hind III, Kpn I, Sal I, Pst I, Pvu II et Xho I. La séquence nucléotidique de la région codante du gène Vk a été déterminée par la méthode de Sanger dans le bactériophage M13, en utilisant l’?-35S dATP comme nucléotide marqué. La comparaison de la séquence des acides aminés codés par la région V du gène isolé avec les séquences d'acides aminés de plusieurs régions Vk montre que le gène isolé code pour la région V du myélome MOPC-467. Le groupe Vk-1 se subdivise en plusieurs sous-groupes selon l'homologie de séquence des acides aminés. Le gène que nous avons caractérisé semble être le gène codant pour les chaînes légères du sous-groupe Vk-1C. Le polymorphisme génétique observé pour différentes souches de souris portant le marqueur Ef2 est probablement dû au polymorphisme du gène codant pour le sous-groupe Vk-1A situé sur un fragment Bam HI de 6.2kb dans la souche BALB/c. De plus, nos résultats mettent en évidence la présence de polymorphisme entre différentes souches de souris pour le sous-groupe Vk-1C. La comparaison de la séquence d'ADN du gène Vk-1C avec les séquences de 3 autres gènes Vk-1 (myélome TEPC 105, gène non-réarrangé de souris NZB et région Vk de la réponse anti-GAT) montre une homologie de séquence de plus de 92%.
dc.language.isofre
dc.publisherUniversité de Sherbrooke
dc.rights© Alain Lavigueur
dc.titleClonage moléculaire d'un gène Vk-1 de souris BALB/c
dc.typeMémoire
tme.degree.disciplineBiochimie
tme.degree.grantorFaculté de médecine et des sciences de la santé
tme.degree.levelMaîtrise
tme.degree.nameM. Sc.


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